Доклинические исследования еще в 1998 году изучали основные механизмы прямого противовирусного действия, которые описаны в инструкции , утвержденной Минздравом Украины для препарата Протефлазид ® , в частности" флавоноиды, входящие в состав препарата, ингибируют репликацию ДНК - вирусов и РНК-вирусов как in vitro, так и in vivo. Доказано, что механизм прямого противовирусного действия заключается в подавлении вирусспецифических ферментов-ДНК-и РНК-полимеразы, тимидинкиназы, обратной транскриптазы и нейраминидазы. Препарат защищает слизистые оболочки, нормализуя показатели их местного иммунитета (лактоферрин, секреторный иммуноглобулин А, лизоцим и С3-компонент системы комплемента). Установлено, что препарат является индуктором синтеза эндогенных α-и γ-интерферонов до физиологически активного уровня." Препарат подавляет окислительные процессы в организме человека, предотвращая возникновение острого респираторного дистресс-синдрома, то есть геморрагической пневмонии.

Как отметил Президент Национальной академии медицинских наук Украины академик Виталий Цымбалюк, по результатам исследования препарата Протефлазид ® было написано 9 докторских и 38 кандидатских диссертаций"в том числе по применению в комплексном лечении больных острым респираторным дистресс-синдромом (ОРДС)". Как известно, в 2020 году ОРЗ стала массовым явлением как осложнение после заболевания COVID-19.

Учитывая тот факт, что коронавирус САРСОВ-2 является РНК-содержащим вирусом, логично было бы предположить, что действующее вещество, противовирусное действие которого на фермент РНК-полимеразы давно изучено, также активно против нового вируса. Это предположение было успешно доказано рядом исследований во время пандемии 2020 года. Весь мир искал и продолжает искать ингибиторы РНК-полимеразы для защиты от вируса SARS-CoV-2. Препараты с таким механизмом действия существуют в Украине уже 20 лет, но почему-то их никто не заметил. А жаль, многих из 20 тысяч погибших можно было бы спасти.

ПРОТЕФЛАЗИД И КОРОНАВИРУСЫ: ИССЛЕДОВАНИЯ НАМН УКРАИНЫ

В отношении коронавирусов эффективность препарата подробно изучалась в Институте эпидемиологии и инфекционных болезней им. Л. В. Громашевского Национальной академии медицинских наук Украины. Действие изучалось в доклинических исследованиях по двум направлениям:

• путем компьютерного моделирования (стыковки) непосредственно с моделью коронавируса-тогда, до конца марта 2020 года, она еще называлась 2019-нКоВ;

• тестирование действия препарата на двух культурах живых клеток, инфицированных коронавирусом трансмиссивного гастроэнтерита свиней (ТГС): вирусом, являющимся дальним родственником SARS-CoV-2 (исследование профессора Светланы Рыбалко).

Методом молекулярного докинга было установлено, что активное вещество "протефлазид" хорошо располагается в каталитическом кармане 3CL-протеазы коронавируса SARS-CoV-2, образуя водородные связи с остатками 144-Ser, Gly-143, расположенными между каталитическими остатками His-163, Asn-142 и Cys145. Это указывает на высокую вероятность подавления активности протеазы 3CL коронавируса SARS CoV-2." Препарат продемонстрировал подавление репликации коронавируса ТГС в клеточной культуре на 5-6 логарифмов, или в миллион раз. Dl * y ссылки: высокоэффективным противовирусным препаратом является тот, который может подавлять репликацию вируса на 2 логарифма, то есть в 100 раз.*

ПРОТЕФЛАЗИД И КОРОНАВИРУСЫ COV-229E И SARS-COV-2: ИССЛЕДОВАНИЯ В ГЕРМАНИИ

В Центре исследований инфекционных заболеваний имени Гельмгольца (Брауншвейг, Нижняя Саксония, Германия) весной-осенью 2020 года была исследована противовирусная активность активного вещества протефлазида in vitro против коронавируса человека CoV-229E, родственного SARS-CoV-2. Методом биолюминесцентной оценки (Dual Luciferase Reporter Gene Assay) доказано подавление репликации вируса CoV-229E под влиянием активного вещества протефлазида. ПРОТЕФЛАЗИД И КОРОНАВИРУС SARS-COV-2: ИССЛЕДОВАНИЯ В ИСПАНИИ

В лаборатории BSL3 Центра исследований здоровья животных (RESA - Centre de Recerca en Sanitat Animal при Институте IRTA, Universitat Autònoma de Barcelona, Каталония, Испания) специфическая противовирусная активность активного вещества протефлазида против коронавируса SARS-CoV-2, выделенного от 89-летнего пациента с COVID-19, была изучена in vitro на культуре клеток Vero E6. В то же время протефлазид проявлял высокую противовирусную активность в отношении SARS-CoV-2. ПРОТЕФЛАЗИД И КОРОНАВИРУС SARS-COV-2: ИССЛЕДОВАНИЯ В США

В Галвестонской национальной лаборатории (GNL, Техас, США) в рамках программы biosafety 3 (BSL-3) были проведены исследования противовирусного действия препарата Протефлазид ® на модели коронавируса SARS CoV-2. Для оценки эффективности исследуемого препарата против SARS-CoV-2 использовали модифицированную реакцию микронейтрализации (MN) на двух моделях клеточных культур: почки африканской зеленой обезьяны (Vero E6) и аденокарциномы альвеолярных базальных эпителиоцитов человека, стабильно экспрессирующих рецептор АПФ-2 человека (A549/ACE2). При исследовании противовирусного действия препарата Протефлазид ® на модели SARS-CoV-2 в концентрациях от 10 до 1,25 мкг/ мл соединение применяли однократно вместе с вирусом за 30 мин и 2 ч до заражения. Установлено, что Протефлазид ® 100% защищал клетки от вирусспецифического цитопатического действия в концентрациях 2,5-1,25 мкг / мл при указанных экспозициях, как на модели культуры Vero E6, так и в концентрациях 5-2, 5 мкг/мл на модели культуры клеток A549/ACE2 (вводили вместе с вирусом через 30 минут и 2 часа).

ФЛАВОНОИДЫ И КОРОНАВИРУС SARS-COV-2

Ряд исследовательских групп в разных странах мира, изучая действующее вещество протефлазид, независимо друг от друга установили ингибирование протеазы коронавируса SARS-CoV-2 флавоноидными соединениями, полученными из различных растений. Так, среди флавоноидных соединений, действующих на коронавирус, названы такие флавоноиды, как апигенин, лютеолин, кверцетин, аментофлавон, дайдзеин, пуэрарин, эпигаллокатехин, эпигаллокатехин галлат, галлокатехин галлат и кемпферол. Природные ароматические полифенолы: апигенин, лютеолин и кверцетин также входят в состав активного вещества протефлазида, и поэтому его влияние на SARS-CoV-2 также можно считать косвенно установленным.

Несомненно, большой интерес представляет и работа, описанная в научной статье "Активация транскрипционного фактора Nrf2". Фактор Nrf2 подавляет за счет снижения экспрессии рецепторов ангиотензинпревращающего гормона 2 (ACE2)-тяжелого острого респираторного синдрома, воспаления и окислительного стресса в выстилающих эпителиоцитах организма человека. С помощью этой научной работы стал ясен механизм действия активного вещества протефлазида, защищающего легкие человека от тяжелого острого респираторного дистресс-синдрома (геморрагической пневмонии), снижающего тяжесть заболевания, вызванного вирусом SARS-CoV-2, и спасающего человеческую жизнь.

Из информации, полученной компанией "Экофарм" из 90 клиник Украины, где препарат Протефлазид ® принимали больные, инфицированные вирусом SARS-CoV-2, с целью профилактики и лечения COVID-19 в легкой, средней и тяжелой фазах заболевания, был сделан важнейший вывод: ни один пациент из более чем 9 тысяч человек, принимавших препарат, не умер - все выздоровели! Это главная задача прямых противовирусных препаратов - уберечь человека от серьезных осложнений и спасти ему жизнь.

Состав действующего вещества протефлазида: флавоноиды апигенин, лютеолин и трицин. Они обладают широким спектром противовирусной активности. Согласно опубликованным исследованиям, они: - Ингибируют репликацию ДНК и РНК вирусов, воздействуя на ряд" мишеней " - вирусспецифические ферменты ДНК и РНК - полимеразы, тимидинкиназы, обратной транскриптазы, нейраминидазы и 3CL-протеазы. - Предотвратить проникновение вируса в эпителиальные клетки. - Блокирует размножение вируса внутри клетки, что защищает клетки организма от окислительного стресса и воспаления, снижая вероятность возникновения острого респираторного дистресс-синдрома и цитокинового шторма.